# The role of AKT inhibitors combined with Ruxolitinib in ameliorating myeloproliferative disorders in mice with CALR gene mutations

## TL;DR

Combining AKT inhibitor MK2206 with Ruxolitinib reduces disease symptoms in mice with CALR gene mutations linked to myeloproliferative disorders.

## Contribution

Demonstrates that combining AKT inhibition with Ruxolitinib improves outcomes in CALR-mutant myeloproliferative tumor models.

## Key findings

- Combined treatment significantly reduced blood platelet and white blood cell counts compared to single treatments.
- Spleen weight and tumor cell infiltration were lower in the combination treatment group.
- Abnormal hematopoietic stem cells and megakaryocyte lineage cells decreased in the combination group.

## Abstract

探讨AKT抑制剂MK2206联合芦可替尼在CALR基因突变的骨髓增殖性肿瘤中的作用。

①获取小鼠骨髓c-kit+细胞：颈椎脱臼处死小鼠，分离股骨、胫骨及髂骨，收集骨髓细胞，分选出c-kit+细胞。②构建CALR移植小鼠模型：利用逆转录病毒体系构建GFP标记的CALR基因突变载体，经Platinum-E细胞包装后，感染小鼠的骨髓c-kit+细胞，经尾静脉注入经致死剂量照射的同种雌性受鼠体内。③移植成功后随机分成四组，分别予以Captisol（15％）、MK2206（60 mg/kg）、芦可替尼（30 mg/kg）、MK2206（60 mg/kg）联合芦可替尼（30 mg/kg）灌胃治疗，连续给药4周，每周给药5 d，监测小鼠外周血血象变化，观察移植小鼠脾脏大小重量。④流式细胞术检测脾脏及骨髓组织中GFP+肿瘤细胞、巨核谱系细胞以及造血干细胞比例，观察小鼠脾脏以及骨髓组织肿瘤细胞浸润程度。

①在灌胃治疗后，MK2206联合芦可替尼治疗组的小鼠外周血血小板和白细胞计数均显著低于MK2206单药治疗组和芦可替尼单药组（P值均<0.05）；②在移植后第30周，MK2206联合芦可替尼治疗组小鼠脾脏重量低于MK2206单药和芦可替尼单药组（P值均<0.05）；③连续给药4周后，联合给药组CALR移植小鼠骨髓以及脾脏组织中巨核谱系细胞、GFP+肿瘤细胞比例明显降低（P值均<0.05）；骨髓组织中异常造血干细胞占比明显下降（P<0.05）；④联合给药组小鼠脾脏及骨髓中肿瘤细胞浸润减轻、异常巨核细胞比例降低。

AKT抑制剂MK2206联合芦可替尼可显著改善CALR基因突变骨髓增殖性肿瘤小鼠的疾病症状与肿瘤细胞浸润。