# Application of next-generation sequencing technology for the investigation of immunoglobulin variable region characteristics and their prognostic significance in patients with chronic lymphocytic leukemia

## TL;DR

This study uses next-generation sequencing to analyze immunoglobulin gene characteristics in chronic lymphocytic leukemia patients and finds associations with prognosis.

## Contribution

The novel use of NGS to investigate immunoglobulin gene rearrangements and subclonal patterns in CLL, linking them to clinical outcomes.

## Key findings

- NGS shows strong correlation with Sanger sequencing for IGHV mutation detection.
- IGHV-mutated patients have higher MYD88 mutation rates and worse prognosis.
- IGLV3-21 usage is linked to advanced disease stages and shorter treatment-free survival.

## Abstract

利用二代测序（NGS）技术分析慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者免疫球蛋白（IG）重链和轻链可变区基因特征、亚克隆情况及预后价值。

采集2018年12月到2023年5月在江苏省人民医院初诊的36例CLL患者［包括12例Ｂ细胞受体（BCR）同型模式患者］的血液和（或）骨髓样本，应用NGS技术检测免疫球蛋白重链（IGH）、轻链（IGK、IGL）基因重排，研究IG基因在CLL中的特点及预后价值。

NGS检测IG重链可变区（IGHV）与Sanger测序具有明显的相关性和较好的一致性（r＝0.957，P<0.001）。36例患者中，9例（25.0％）患者IGHV有突变、27例（75.0％）患者IGHV无突变。MYD88突变在IGHV有突变患者中发生率更高［1/27（3.7％）对4/9（44.4％），P＝0.009］。BCR同型模式IGHV #8/8B亚组患者的12号染色体三体（+12）［4/11（36.4％）对1/25（4.0％），P＝0.023］的发生率更高，并更易发生Richter转化［8/11（72.7％）对4/25（16.0％），P＝0.002］。36例患者使用IGKV（36/36，100％）；15例使用IGLV（15/36，41.7％），其中IGLV3-21（5/15，33.3％）的使用率最高：患者均为Binet C分期及Rai Ⅲ～Ⅳ期，del（13）（q14）的发生率为60.0％（3/5）。使用和非使用IGLV3-21基因片段患者的中位至首次治疗时间（TTFT）分别为5.2（1.1～41.5）个月和9.9（0.1～94.4）个月。当定义2.5％的总检测片段条数（total reads）为IGHV亚克隆阈值时，检测出4例（4/36，11.1％）样本具有2个功能性克隆。有突变单克隆组（8/36，22.2％）和有突变双克隆组（1/36，2.8％）患者的中位TTFT分别为2.8（0.9～72.7）个月和12.8个月，中位总生存（OS）期分别为57.5（32.0～120.7）个月和51.8个月；无突变单克隆组（24/36，66.7％）和无突变双克隆组（2/36，5.6％）患者的中位TTFT分别为10.9（0.3～94.4）个月和6.3（0.1～12.5）个月，中位OS期分别为49.9（22.2～211.1）个月和30.0（9.6～50.3）个月（P>0.05）。

应用NGS技术检测IG基因重排，不仅能分析IGHV的突变状态、优势克隆、判断预后，还能够研究IGK/IGL的基因重排片段及亚克隆的使用情况，为IGLV3-21 CLL的不良预后研究提供了线索。IGHV无突变的双克隆可能提示预后不良。